HepG2细胞介绍
HepG2细胞系是一种具有上皮样形态的细胞，该细胞系源自一名15岁阿根廷白人男性患者的肝细胞癌组织。HepG2细胞能够分泌多种血浆蛋白，包括清蛋白、α2-巨球蛋白、血纤维蛋白溶酶原及铁传递蛋白等。这一细胞系由Wistar研究所获得，适合用于转染实验。其主要的标志物包括胰岛素及胰岛素样生长因子II（IGFII）。HepG2细胞的生长特性表现为紧密排列在一起形成片状，最初在培养瓶壁上附着形成小岛结构，后期可形成多层堆积或悬浮状态。由于其强烈的贴壁性，HepG2细胞广泛应用于研究肝细胞的功能及病毒模型。

培养条件
HepG2细胞适合在特定的培养环境中生长，推荐使用87% MEM（含NEAA）、10%进口胎牛血清、1% L-alanyl-L-glutamine、1%丙酮酸钠及1%双抗的培养基。在气体环境方面，应维持在95%空气与5%二氧化碳的比例，温度设定为37℃。在细胞培养过程中需注意更换培养基的频率，以保持细胞的生长状态良好。

传代培养
对于贴壁生长的HepG2细胞，在细胞开始脱落时，应将培养液转移到无菌离心管中，通过离心收集悬浮细胞。轻柔去除培养基，并添加胰酶对贴壁细胞进行消化。消化后应迅速中和并用完全培养基稀释细胞。再次离心后，计数并调整细胞的密度，以便以适宜的接种量转移至培养瓶中。

细胞冻存与复苏
在细胞生长至80%以上时，需要进行冻存操作。重悬细胞沉淀于适量的低温冻存液中，分装后置于-80℃超低温冰箱一夜，之后可转移至液氮中长期保存。复苏时，需在37°C水浴中迅速解冻，并进行细胞的离心和重悬，直至细胞密度达到操作要求。

常见问题解答
1. 当培养过程中出现细胞碎片时，通常是由细胞的生理特性所致，并不可避免。使用适当的培养条件有助于减少此类现象的发生。
2. HepG2细胞中存在的空泡现象属正常特征，无需过分担忧。
3. 细胞增长速度缓慢时，可尝试增加血清浓度来促进细胞生长.
4. 对于细胞聚团或不贴壁现象，尽量使用高质量的胎牛血清以及适当的pH值来提高细胞的贴壁性。
5. 如遇漂浮细胞，建议使用台盼蓝检查活性，并与其他细胞共同培养以促进贴壁。

在生物医学领域，HepG2细胞的广泛应用以及其对培养条件的敏感性使其成为研究肝功能和药物反应的重要工具。选择尊龙凯时的高品质培养基和试剂，可以有效提升细胞实验的成功率。

参考文献
截至2024年，HepG2相关的研究文献数量已达72篇，总影响因子为467.07。为便于研究者查阅，以下列举几篇具代表性的文献供参考：1. Dienediamine: A safe surrogate for the herbicide paraquat. Molecular Plant, 影响因子：275。2. Photodegradation of carbon dots causes cytotoxicity. Nature Communications, 影响因子：14.9193。3. Ubiquitin-specific protease 1 facilitates hepatocellular carcinoma progression by modulating mitochondrial fission and metabolic reprogramming. CELL DEATH AND DIFFERENTIATION, 影响因子：13.74。4. Site-specific ubiquitination of VDAC1 restricts its oligomerization and mitochondrial DNA release in liver fibrosis. EXPERIMENTAL AND MOLECULAR MEDICINE, 影响因子：12.85。5. Accumulation of nanoplastics in human cells as visualized and quantified by hyperspectral imaging. ENVIRONMENT INTERNATIONAL, 影响因子：11.8。

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